核酸纯化柱的选择专题3:不同样品用量对吸附效率的影响;交流咨询QQ:1492876083

核酸纯化柱的选择专题3不同样品用量对吸附效率的影响;交流咨询QQ:1492876083

本测试方法:

通过质粒提取试剂盒测试不同体积的菌液,分析其吸附浓度

实验室设计

1:选择实际层数为6层(1mm厚,相当于市场厚度的一倍,市场大多是0.5mm厚膜,可自行拆解观察厚度,不同公司选择厚度不一样)

2:本次50微升体积洗脱测定一次浓度然后将样品补充50微升洗脱缓冲液将其从新加入核酸纯化柱洗脱测定浓度测试硅胶膜的洗脱效率。

3:起始浓度的菌液选取2;3;4;5;6;7;8;9mL测试

4:选择PUC19质粒DH5A菌作为提取对象。

实验材料

PUC19质粒DH5A菌株,分光光度计

实验方法

按照艾比根质粒小量提取试剂盒提取过夜培养的菌液,测定浓度

实验结果数据分析

PUC19质粒提取原始测量浓度数据:

菌液体积

洗脱

体积

260/280

260/230

Conc. (Ng/ul)

2mL

50ul

2.08

2.27

185.3

3mL

50ul

2.02

2.24

270.9

4mL

50ul

1.95

2.21

348.4

5mL

50ul

1.95

2.22

349.1

6mL

50ul

1.98

2.24

304.1

7mL

50ul

2.0

2.26

287.3

8mL

50ul

1.98

2.19

290

9mL

50ul

1.97

2.22

321.1

2mL

100ul

2.1

2.24

117.8

3mL

100ul

2.12

2.3

172.8

4mL

100ul

2.1

2.3

229.9

5mL

100ul

2.08

2.28

225.3

6mL

100ul

2.07

2.28

193.7

7mL

100ul

2.08

2.27

222.2

8mL

100ul

2.07

2.28

189.9

9mL

100ul

2.07

2.26

213.4

4mL以后变化不大,具体请自行测试

结果分析及建议:

  1. 质粒小量提取起始菌液控制在5mL以内,以免裂解不充分造成产量降低。

  2. 如果需要收集更多体积的菌液,可以增加相应试剂的比例进行提取。

  3. 如果需要得到更多产量的质粒,可以收集多管裂解液过同一个柱子进行吸附洗脱。

  4. 本次实验只是艾比根实验室数据参考,以便你在选择合适纯化柱能够更好的判断您的需要。

不同实验条件有所差别,精确实验需要您根据自己的配方和实验条件进行研究测试,本次实验仅供参考。